Cтворення трансгенних рослин салату, що містять ген зшитого білка антигенів ESAT6:Ag85b з Mycobacterium tuberculosis

Трансгенні рослини є багатообіцяючим і безпечним інструментом для створення їстівних вакцин. Імунізація, що відбувається внаслідок вживання в їжу рослин, у яких проходить експресія туберкульозних антигенів, є перспективним підходом у боротьбі з туберкульозом. У цій роботі ми повідомляємо про створення трансгенних рослин салату (Lactuca sativa), що містять ген зшитого білка антигенів Mycobacterium tuberculosis ESAT6:Ag85B. Трансгенні рослини були отримані методом трансформації за допомогою Agrobacterium tumefaciens. У роботі були використані вектори, що містять ген esx A, зшитий з геном fbpB. Також вектори містили селективні гени: ген неоміцинфосфотрансферази (npt II) або фосфінотрицин ацетилтрансферази (bar). На селективному середовищі були відібрані трансгенні рослини салату. Наявність селективного та цільового генів у геномі цих рослин була підтверджена за допомогою ПЛР. Трансгенні рослини салату були висаджені в ґрунт в умовах теплиці для проведення наступних досліджень.

Рік видання: 
2013
Номер: 
3
УДК: 
577.222.7:581.1
С. 65–69. Іл. 4. Табл. 1. Бібліогр.: 18 назв.
Література: 

1. Татьков С.И., Дейнеко Е.В., Фурман Д.П. Перспективы создания противотуберкулезных вакцин нового поколения // Вавиловский журнал генетики и селекции. — 2011. — 15, № 1. — С. 114—128.
2. D. Young and C. Dye, “The development and impact of tuberculosis vaccines”, Cell, vol. 124, pp. 683—687, 2006.
3. I.M. Orme, “Current progress in tuberculosis vaccine development”, Vaccine, vol. 23, no. 18, pp. 2105—2108, 2005.
4. P. Andersen and T.M. Doherty, “Learning from BCG: Designing a better tuberculosis vaccine”, Discov. Med., vol. 5, no. 28, pp. 383—387, 2005.
5. J.A. Langermans et al., “Protection of macaques against Mycobacterium tuberculosis infection by a subunit vaccine based on a fusion protein of antigen 85B and ESAT-6”, Vaccine, vol. 23, no. 21, pp. 2740—2750, 2005.
6. J. Davila et al., “Assessment of the genetic diversity of Mycobacterium tuberculosis esxA, esxH, and fbpB genes among clinical isolates and its implication for the future immunization by new tuberculosis subunit vaccines Ag85B-ESAT-6 and Ag85B-TB10.4”, J. Biomed. Biotechnol., 6 p., Jun. 2010.
7. C. Agaard et al., “A multistage tuberculosis vaccine that confers efficient protection before and after exposure”, nNat. Med., vol. 17, no. 2, pp. 189—194, 2011.
8. Y.L. Dorokhov et al., “Superexpresion of tuberculosis antigens nin plant leaves”, Tuberculosis, vol. 87, no. 3, pp. 218—224, 2007.
9. A.W. Olsen et al., “Protective effect of a tuberculosis subunit vaccine based on a fusion of antigen 85B and ESAT-6 in the aerosol guinea pig model”, Infection and Immunity, vol. 72, no. 10, pp. 6148—6150, 2004.
10. S. Tiwari et al., “Plants as bioreactors for the production of vaccine antigens”, Biotechnol. Adv., vol. 27, no. 4, pp. 449—467, 2009.
11. Трансгенные растения для фармакологии / Е.Б. Ру- кавцова, Я.И. Бурьянов, Н.Я. Шульга, В.А. Быков // Вопр. биолог., мед. и фарм. химии. — 2006. — № 2. — С. 3—12.
12. C.O. Tacket et al., “Human immune responses to a novel norwalk virus vaccine delivered in transgenic potatoes”, J. Infect. Dis., vol. 182, no. 1, pp. 302—305, 2000.
13. L.J. Richer et al., “Production of hepatitis B surface antigen in transgenic plants for oral immunization”, Nat. Biotechnol., vol. 18, no. 11, pp. 1167—1171, 2000.
14. T. Murashige and F. Skoog, “A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture”, Physiologia Plantarum, vol. 15, pp. 473—497, 1962.
15. O. Gamborg et al., “Nutrient reguirements of suspesion cultures of soybean root cells”, Exp. Cell Res., vol. 50, pp. 151—158, 1968.
16. J.J. Doyle and J.L. Doyle, “Isolation of plant DNA from fresh tissue”, Focus, vol. 12, pp. 13—15, 1990.
17. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Пер. с англ. — М.: Мир, 1984. — 545 с.
18. Агробактериальная трансформация салата (Lactuca sativa L.) конструкциями, несущими гены антибактериальных антигенов Mycobacterium tuberculosis / Н.А. Матвеева, М.Ю. Василенко, А.М. Шаховский, Н.В. Кучук // Цитология и генетика. — 2009. — № 2. — С. 27—32.

Список літератури у транслітерації: 

1. Tat'kov S.I., Deĭneko E.V., Furman D.P. Perspektivy sozdanii͡a protivotuberkuleznykh vakt͡sin novogo pokolenii͡a // Vavilovskiĭ zhurnal genetiki i selekt͡sii. – 2011. – 15, # 1. – S. 114–128.
2. D. Young and C. Dye, “The development and impact of tuberculosis vaccines”, Cell, vol. 124, pp. 683–687, 2006.
3. I.M. Orme, “Current progress in tuberculosis vaccine development”, Vaccine, vol. 23, no. 18, pp. 2105–2108, 2005.
4. P. Andersen and T.M. Doherty, “Learning from BCG: Designing a better tuberculosis vaccine”, Discov. Med., vol. 5, no. 28, pp. 383–387, 2005.
5. J.A. Langermans et al., “Protection of macaques against Mycobacterium tuberculosis infection by a subunit vaccine based on a fusion protein of antigen 85B and ESAT-6”, Vaccine, vol. 23, no. 21, pp. 2740–2750, 2005.
6. J. Davila et al., “Assessment of the genetic diversity of Mycobacterium tuberculosis esxA, esxH, and fbpB genes among clinical isolates and its implication for the future immunization by new tuberculosis subunit vaccines Ag85B-ESAT-6 and Ag85B TB10.4”, J. Biomed. Biotechnol., 6 p., Jun. 2010.
7. C. Agaard et al., “A multistage tuberculosis vaccine that confers efficient protection before and after exposure”, Nat. Med., vol. 17, no. 2, pp. 189–194, 2011.
8. Y.L. Dorokhov et al., “Superexpresion of tuberculosis antigens in plant leaves”, Tuberculosis, vol. 87, no. 3, pp. 218 224, 2007.
9. A.W. Olsen et al., “Protective effect of a tuberculosis subunit vaccine based on a fusion of antigen 85B and ESAT-6 in the serosol guinea pig model”, Infection and Immunity, vol. 72, no. 10, pp. 6148–6150, 2004.
10. S. Tiwari et al., “Plants as bioreactors for the production of vaccine antigens”, Biotechnol. Adv., vol. 27, no. 4, pp. 449 467, 2009.
11. Transgennye rastenii͡a dli͡a farmakologii / E.B. Rukavt͡sova, I͡A.I. Bur'i͡anov, N.I͡A. Shul'ga, V.A. Bykov // Vopr. biolog., med. i farm. khimii. – 2006. – # 2. – S. 3–12.
12. C.O. Tacket et al., “Human immune responses to a novel norwalk virus vaccine delivered in transgenic potatoes”, J. Infect. Dis., vol. 182, no. 1, pp. 302–305, 2000.
13. L.J. Richer et al., “Production of hepatitis B surface antigen in transgenic plants for oral immunization”, Nat. Biotechnol., vol. 18, no. 11, pp. 1167–1171, 2000.
14. T. Murashige and F. Skoog, “A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture”, Physiologia Plantarum, vol. 15, pp. 473–497, 1962.
15. O. Gamborg et al., “Nutrient reguirements of suspesion cultures of soybean root cells”, Exp. Cell Res., vol. 50, pp. 151–158, 1968.
16. J.J. Doyle and J.L. Doyle, “Isolation of plant DNA from fresh tissue”, Focus, vol. 12, pp. 13–15, 1990.
17. Maniatis T., Frich Ė., Sėmbruk Dzh. Metody geneticheskoĭ inzhenerii. Molekuli͡arnoe klonirovanie / Per. s angl. – M.: Mir, 1984. – 545 s.
18. Agrobakterial'nai͡a transformat͡sii͡a salata (Lactuca sativa L.) konstrukt͡sii͡ami, nesushchimi geny antibakterial'nykh antigenov Mycobacterium tuberculosis / N.A. Matveeva, M.I͡U. Vasilenko, A.M. Shakhovskiĭ, N.V. Kuchuk // T͡Sitologii͡a i gene¬tika. – 2009. – # 2. – S. 27–32.

Текст статтіРозмір
2013-3-10.pdf521.79 КБ

Тематичні розділи журналу

,