Влияние концентрации глюкозы в питательной среде на биосинтез рекомбинантного аналога белка gp120 ВИЧ-1

Значительное место в комплексе профилактических мероприятий при ВИЧ-инфекции принадлежит обследованию различных контингентов населения на наличие специфических серологических маркеров инфицирования. Сегодня наиболее широко применяемой практикой серологического обследования на ВИЧ является тестирование населения с целью выявления антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Рекомбинантные аналоги белка вирусной оболочки gp120 ВИЧ-1 широко используются во всех современных иммуноферментных тест-системах для диагностики ВИЧ-инфекции. Наше исследование было направлено на подбор оптимальных условий культивирования штамма-продуцента белка rgp120. В работе реализованы две стратегии высокоплотностного культивирования: с периодической подачей субстрата и экспоненциальная стратегия подпитки. Экспоненциальная стратегия позволяет поддерживать скорость роста культуры на заданном уровне с помощью автоматической регуляции скорости подачи глюкозы в питательную среду. Данная стратегия позволяет достигать высоких конечных значений оптической плотности культуры, а также высокого выхода целевого продукта.

Год издания: 
2012
Номер: 
3
УДК: 
602.44:543.544.17:577.112
С. 61—65. Іл. 2. Табл. 1. Бібліогр.: 8 назв.
Литература: 

1. J. Shiloacha and R. Fass, “Growing E.coli to high cell density — a historical perspective on method development”, Biotechnology Advances, vol. 23, pp. 345—357, 2005.
2. Y. Morikawa et al., “HIV-l envelope protein gp 120 expression by secretion in E. coli: assessment of CD4 binding and use in epitope mapping”, J. of Virological Method, vol. 29, pp.105—114, 1990.
3. D.J. Korz et al., “Simple fed-batch technique for high cell density cultivation of Escherichia coli”, J. of Biotechnology, vol. 39, pp. 59—65, 1995.
4. J. Aulicino and M. Hermida, “Developing an automatically controlled feeding process in an E.coli fermentation process for recombinant protein production”, The Science& Business of Biopharmaceuticals, vol. 6, pp. 2—7, 2010.
5. U. Laemmli, “Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4”, Nature, vol. 227, pp. 680—685, 1970.
6. pET System Manual, Novagen, 2003, 68 p.
7. Jong Hyun Choia et al., “Production of recombinant proteins by high cell density culture of Escherichia coli”, Chem. Eng. Sci., vol. 61, pp. 876—885, 2006.
8. K. Hellmuth et al., “Effect of growth rate on stability and gene expression of recombinant plasmids during continuous and high cell density cultivation of Escherichia coli TG1”, J. of Biotechnology, vol. 32, pp. 289—298, 1994.

Полнотекстовый документSize
2012-3-10.pdf258.02 KB

Тематичні розділи журналу

,